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果蝇杂交实验 实验人：经燕珊（1431057）、韦丞佳（1431058）、韦海浪（1431059）、韦彩岭（1431060）、韦海涛（1431061） 实验时间：9月-12月 实验地点：生技楼202 1、 实验材料及方法 1.1实验材料 果蝇品系及性状：Canton-s黑体红眼果蝇、yw黄体白眼果蝇、w118灰体白眼果蝇 1.2实验用品 培养基成分：玉米粉、白砂糖、酵母粉、琼脂粉、丙酸 麻醉：乙醚，麻醉瓶，棉签，牙签。 分析性状：镊子、解剖镜，滤纸。其他试剂和用具：75%乙醇、饲养瓶（指管）、棉花、纱布、棉球、棉绳、微波炉、恒温培养箱、电热炉、铝锅、天平、烧杯； 1.3培养基的配制 量取760ml水，160g玉米粉，62g白砂糖放到同一个铝锅，搅匀，电热炉加热，直到稍微感觉到粘稠加入6g琼脂粉，搅拌，煮开之后加入16g酵母粉，必须搅匀。关上电热炉，待培养基稍微冷却（大概50℃-60℃），加入6ml丙酸，搅匀即可。 1.4实验流程 1.4.1果蝇的基本培养方法 （1）麻醉方法 先轻轻敲打培养瓶，让果蝇落倒培养瓶的底部，取下瓶塞，然后迅速将培养瓶口向下扣在麻醉瓶口上，使两瓶口对正对严，以防飞逸。 麻醉瓶在上，使果蝇向上爬入麻醉瓶中，取一棉花塞塞住瓶口，翻转麻醉瓶使其瓶口朝上，迅速将含有乙醚的棉签放入其中，盖住瓶口，约一分钟左右果蝇倒卧于瓶底，即可将果蝇倒出进行操作。 （2）果蝇交配 ①收集处女蝇：处女蝇指雌果蝇自羽化开始10小时之内尚未成熟而无交配能力的果蝇。先把培养瓶中的老果蝇全部放飞，收集10小时之内羽化出来的新果蝇，麻醉后用解刨镜将果蝇雌雄分开，这时得到的雌果蝇应该全部都是处女蝇。先不要放入雄蝇，3天后看雌蝇是否产卵，如果产卵就不是处女蝇了。 ②交配：杂交时把所需品系的雄蝇直接放到处女蝇培养瓶中，贴好标签，注明两亲本的基因型及交配日期，进行培养。6～8天后倒掉亲本（一定要倒干净，以免亲代和子代混淆），待F1成蝇羽化后开始计算，观察性状。可靠的计数及观察是培养开始的20天以内（再晚F2也可能有了）。若须继续实验，观察F2，可在F1内挑出雌雄数对，另外培养，因为这次是用F1作亲本，进行个体间互交，所以这时不是处女蝇也可以。 1.4.2本实验具体操作 本实验验证孟德尔的基因分离定律，以眼色为观察指标。收集300左右只子代即终止实验。 （1）Canton-s♀黑体红眼×yw♂黄体白眼 收集5只Canton-s♀黑体红眼处女蝇果蝇与yw黄体白眼果蝇杂交，6天后放飞亲本，第7天收集F1。 （2）Canton-s♂黑体红眼×yw♀黄体白眼 收集5只Canton-s♂黑体红眼果蝇与yw黄体白眼处女蝇杂交，6天后放飞亲本，第7天收集F1。 （3）Canton-s♂黑体红眼×yw♀黄体白眼 收集15只Canton-s♂黑体红眼果蝇与w118黑体白眼处女蝇杂交，6天后放飞亲本，第7天收集F1。 2、 实验结果及分析 （1） Canton-s♀黑体红眼×yw♂黄体白眼 F1眼色全部为红眼，红眼雌性有150只，红眼雄性有145只。从F1中拿出60只分三组进行自交实验，每组有10只红眼雌性，10只红眼雄性。 F2中，红眼的都为雌性，白眼的都为雄性。 第一组 第二组 第三组 合计 2子二代的х检验 实得数 预期数 实得数-预期数 （实得数-预期2数）/预期数 2红眼雌性 178 155 178 511 白眼雄性 172 157 176 505 红眼雌性 511 508 3 0.006 白眼雄性 505 508 3 0.006 合计 1016 1016 0 0.012 n=1 х=0.012 0.75实得数与理论值没有显著差异，符合孟德尔的基因分离定律。
（2） Canton-s♂黑体红眼×yw♀黄体白眼
F1中，红眼的都为雌性，白眼的都为雄性，红眼雌性有177，白眼雄性有171。从F1中拿出60只分三组进行自交实验，每组有10只红眼雌性，10只红眼雄性。
F2
第一组 第二组 第三组 合计
2
红眼 ♀ 177 170 187 534 红眼雌性 ♀
♂ 523 527.75 4.75
534 527.75 6.25
♂ 178 160 185 523
白眼 ♀ 181 160 187 528 白眼雄性 ♀ 528 527.75 0.25
♂ 526 527.75 1.75
2111 2111 0
♂ 168 170 188 526
合计
子二代的х检验 实得数 预期数 实得数-预期数
（实得
2
数-预期数）/预期数
2
0.0740 0.0428 0.0001 0.0058 0.1227
n=3 х=0.1227 0.99实得数与理论值没有显著差异，符合孟德尔的基因分离定律。
（3）（3）Canton-s♂黑体红眼×yw♀黄体白眼
F1中，红眼的都为雌性，白眼的都为雄性，红眼雌性有246，白眼雄性有238。从F1中拿出60只分三组进行自交实验，每组有10只红眼雌性，10只红眼雄性。
第一组 第二组 第三组 合计
2
红眼 ♀ 197 176 176 549 红眼雌性 ♀
♂ 552 548 4 0.0073
549 548 1 0.0018
♂ 192 181 179 552
白眼 ♀ 196 181 174 551 白眼雄性 ♀ 551 548 3 0.0055
♂ 540 548 8 0.0146
2192 2192 0 0.0292
♂ 193 184 163 540
合计
子二代的х检验 实得数 预期数 实得数-预期数
（实得
2
数-预期数）/预期数
2
n=3 х=0.0292 0.99实得数与理论值没有显著差异，符合孟德尔的基因分离定律。
3、 结论与讨论
果蝇的眼色遗传符合孟德尔的基因分离定律。在实验过程中容易发生污染可能的原因是：（1）实验室的卫生没有保障，导致一些微生物进入到培养基中污染；（2）在操作过程中没有一次性手套，也没有保持手的清洁，让手上的一些微生物进入到培养基中污染；（3）清洗瓶子时，只洗掉了看得见的赃物，可能还残留一些赃物，在给瓶子灭菌时，也没有经过高温高压灭菌，只是在微波炉中烘干，灭菌过程相对来说比较草率。
4、 体会
在几个月的实验中，有了很多体会，下面我就把体会一一列出来，也算是给几个月与果蝇接触的时间一个交代。
（1） 实践与理论的距离比想象中的大得多。
在培养基配制过程中，尽管用具都消毒好，操作也小心翼翼的，但是难免会有污染的现象；收集处女蝇的过程中，可谓是千辛万苦，上课、做实验什么的平时就很忙，好不容易掐准时间到了收集处女蝇的时候，打开瓶子果蝇就到处乱飞，好不容易收集好了，用乙醚麻醉的时候，果蝇又死了很多，收集得到果蝇，在镜下观察的时候，解剖镜太烫把果蝇烫死了，如果还没被烫死，从麻醉中醒来的果蝇都飞走了。
（2） 自身的团队协作精神需要加强
这次的实验没有好的点子是因为大家没有商量好，后来只能验证孟德尔基因分离定律了。
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2022-09-09
