老鼠肝门静脉灌流实验

2023-02-16 08:20:21   第一文档网     [ 字体: ] [ 阅读: ] [ 文档下载 ]
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门静脉,老鼠,实验

1 麻醉:麻醉老鼠并针扎固定于泡沫板

2 分离肝门静脉:用棉签拨开胃肠,于其后可见两条较粗静脉(最粗的为下腔静脉,需分

离部分组织后才可见,第二粗的即为肝门静脉)

3 灌流:温浴后连通I液,低流速灌流,如果入针顺利肝叶会血色渐退变成白色,I液进去

40ml左右后,流速控制在30-45之间。II液用之前一直保持37℃温浴,用前加入1管胶原酶,将转速调慢-关闭-II液,慢慢升速至40-45左右,进液30ml左右后停止灌流,分离肝组织(去除胆囊)

4 洗肝:在无血清的DMEM中用力甩洗几次,消化完全会散落大量肝细胞,最后只剩下一

个空的肝躯壳

5 离心:150rpm-120-100-80-60-60 各离心2min

6 计数铺板:由于正常干细胞无法增殖,故保持在一定密度


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