高中生物选修3 DNA重组技术的基本工具知识点

2022-05-28 10:35:27 第一文档网 [ 字体：小中大 ] [

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高中生物选修3 DNA重组技术的基本工具知识点

1．基因工程理论基础：

（1）物质基础——脱氧核苷酸

（2）结构基础——规则的双螺旋结构

（3）传递和表达的基础——中心法则；共用一套遗传密码；碱基互补配对

原则

2. DNA重组技术的基本工具：

（1）限制性核酸内切酶——“分子手术刀” （2）DNA连接酶——“分子缝合针”

（3）基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”

3. 限制性核酸内切酶：又称限制酶，主要从原核生物中分离纯化出来的。它们能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。

4. DNA分子经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式——粘性末端和平末端。

5. DNA解旋酶——断H键；DNA水解酶——切割磷酸二酯键。 6. 限制酶——形成片段DNA；DNA聚合酶——形成磷酸二酯键。

7. DNA连接酶：能够将两条DNA链连接起来的，称之为DNA连接酶。 8. DNA连接酶的来源：从大肠杆菌中分离出来的和从T4噬菌体中分离出来的。从大肠杆菌中分离出来的称为E·coliDNA连接酶；从T4噬菌体中分离出来的称为T4DNA连接酶。

9. E·coliDNA连接酶只能将双链DNA片段互补的粘性末端连接起来；T4DNA连接酶既可以连接双链DNA片段互补的粘性末端，又可以连接双链DNA片段的平末端。

10. 基因进入受体细胞的载体：用质粒作为载体，将基因送入细胞中。

11. 质粒：是一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外，并具有自我复制能力的很小的双链环状DNA分子。 12. 成为质粒的条件：

（1）质粒DNA分子上有一个至多个限制酶切割位点，供外源DNA片段插入其中。

（2）能在细胞中进行自我复制，或整合到染色体DNA上，随染色体DNA进行自我复制。

（3）质粒DNA分子上有特殊的标记基因，例如：四环素抗性基因，供重组DNA的鉴定和选择。

（4）对受体细胞无害。（5）大小适中。

13. 基因进入受体细胞的载体有：质粒；λ噬菌体的衍生物；动植物病毒。 14. 真正被用作载体的质粒，都是在天然载体的基础上进行过人工改造的。

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