小鼠毒力实验

2023-03-11 20:27:48   第一文档网     [ 字体: ] [ 阅读: ] [ 文档下载 ]
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小鼠,实验

1.1 材料 供试小白鼠为体重16~18 g的清洁级昆明系小白鼠(雌雄各)110,购自 ,常规饲养。 1.2 试验方法

(1)菌液的制备 利用平板菌落计数法(麦氏比浊法)将供试菌株进行活菌计数,并分别稀释成10-110-210-310-410-5cfu/mL 5个稀释度的菌悬液。

(2)感染小白鼠发病、死亡规律及LD50测定 先通过预试验测出最小致死剂量最大存活剂量,在此基础上进行正式试验。将60只小白鼠随机等分成6个组,每组10只,1~5组小白鼠分别经腹腔注射P10-1

10-210-310-410-5cfu/mL 5个稀释度的菌悬液0.2 mL/,6小白鼠腹腔注射无菌PBS 0.2 mL/只作对照。接种后观察其发病、死亡情况,包括小白鼠精神、食欲、被毛光泽度、体格状况、警觉性以及躲避捕捉的能力等,每天观察3~4,连续观察14 d,做好记录。 采用简化寇氏法按下式分别计算菌株对小白鼠的半数致死量。

lgLD50=Xm-d(P-0.5)

式中,Xm为最大剂量的对数;d为组距;P为各组死亡率之和。 (3)细菌学检查及病理学观察 对死亡小白鼠及时尸检,无菌条件下取肝脏、心血等病料进行细菌的分离鉴定;观察心、肝、脾、肺、肾等组织器官的大体病变,未死亡的小白鼠于用断椎法处死,同上进行细菌学检查及病理学观察。 2结果与分析


2.1 感染小白鼠发病、死亡情况及半数致死量

在接种不同菌株不同剂量的菌液后,接种郑3株的试验小白鼠最早于感染后24 h开始出现临床症状,之后高剂量组小白鼠开始出现死,4 d后半数以上小白鼠表现临床症状,死亡高峰集中在5~7 d,9 d停止死亡。各剂量组小白鼠共死亡24,总死亡率为48%,LD501015.71

接种北京株的试验小白鼠最早于感染后24 h即表现临床症状,并且10-1cfu/mL剂量组小白鼠最先开始死亡,3 d内半数以上小白鼠表现临床症状,死亡高峰集中于4~6 d,8 d后停止死亡,各剂量组小白鼠共死亡26,总死亡率为52%,LD501013.61.


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