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分子生物学实验 教学大纲 课程编号：14120107010 适用专业：生物科学 学时数：36 学分数：1 一、实验目的与要求： 分子生物学实验是生物技术专业的一门专业基础课程，是一门独立的实验课程，同时也是为了配合分子生物学的教学而开设的。实验过程中,首先将有关的基本原理、基本技术和方法给学生做一介绍，然后将分子生物学实验中要用到的仪器以课件的形式展示给学生，在学生掌握了以上基本知识的基础上给定实验内容和目的,让学生自行设计实验方案并完成,得出一定的实验结论。希望通过本实验培养学生主动学习、学以致用、独立思考的能力。 二、实验项目与提要： 序号 实验项目 必做 选做 时数 内 容 提 要 实验 类型 每套仪 器人数 利用碱变性方法从E.coli中细菌质粒的大量提取 大量提取基因工程中运载必做 3 基因的载体质粒，掌握最常基础 见的碱变性大量制备质粒DNA技术方法。 去除质粒DNA中的杂质，纯质粒DNA的纯化 化质粒DNA以利于以后的必做 3 酶切分析和克隆。通过实基础 验，掌握最常用的苯酚氯仿法去除蛋白质和RNA酶分第 1 页/ 共 3 页 2 2 1 2 解RNA的方法。 3 动物基因组DNA的提取 必做 6 了解从动物组织中提取DNA的基本原理及其方法 学习水平式琼脂糖凝胶电琼脂糖凝胶电泳 泳，检测质粒DNA和染色体必做 3 DNA的纯度，检测质粒DNA基础 的构型，含量以及分子量的大小。 DNA的限制5 性内切酶酶切及电泳检测 DNA酶切片6 段的分离与必做 回收 3 必做 3 学习用限制性内切酶酶切DNA片段的原理与方法，在体外对质粒DNA或染色体基础 DNA进行酶切，并进行电泳检测 学习从琼脂糖凝胶中分离回收DNA片段的几种方法基础 的原理与操作技术 学习PCR反应的基本原理与PCR扩增技术 实验技术，了解引物设计的必做 6 一般要求。 进行PCR反应，体外扩增得到特异性DNA片段 SDS－PAGE聚丙烯酰胺8 凝胶电泳检必做 测重组蛋白的表达 6 了解SDS－PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳的原理，掌握进行SDS－PAGE聚丙烯酰胺基础 凝胶电泳检测重组蛋白表达的技术与方法 了解总RNA和mRNA提取的9 RNA的提取 选做 6 基本原理，从真核细胞中提综合 取总RNA并进行琼脂糖凝第 2 页/ 共 3 页 2 2 基础 2 2 2 2 基础 2 4 7 本文来源：https://www.dywdw.cn/cb27f22e2ec58bd63186bceb19e8b8f67d1cef6b.html
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2023-01-08
