支气管肺泡灌洗液收集及保存

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支气管肺泡灌洗液收集及保存

实验对象:遵义市第一人民医院呼吸科各种肺部疾病患者(随机收集30例) 实验器材:

试剂: RPMI1640培养液(l0%胎牛血清、10%二甲亚砜)

仪器及器材:硅化灭菌离心管、100μm细胞过滤器、离心机、冷冻盒、-80℃冰箱、微量加样器、4℃冰箱、-150℃冰箱 实验步骤路线图:

1BAL液收集2ml硅化灭菌离心管内,保存在 4°C条件下

2通过100微米细胞过滤器过滤BAL液,储存在新硅化灭菌离心管

3BAL液在4504ºC条件下离心7分钟

4、微量加样器吸取上清液并保留在冷冻盒,-80°C冰箱冻存 5悬液中加入1mlRPMI1640培养液10%胎牛血清、10%二甲基亚砜),然后置于冷冻盒中冷冻至-80°C 6 -150°C冻存

7、解冻,快速在37°C条件下解冻细胞进行下一步实验。

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